「TORTOISE HERPESVIRUS INFECTION」
University of Florida, College of Veterinary Medicine
翻訳 森リクガメ研究所
TORTOISE HERPESVIRUS INFECTION
(http://www.vetmed.ufl.edu/sacs/wildlife/TortoiseHerpesvirus/Pages/THerp.html)
歴史: リクガメへのヘルペスウィルスと思われる感染に関する最初の報告は、飼育下で孵化され、また6年間飼育された、健康状態の悪いゴファーガメ(Gopherus
agassizi)のもので、それは咽頭の膿瘍(ハーパーら、1982年)を持っていた。
二番目の報告は、60年飼育されたゴファーガメのもので、そのカメは、口腔や後鼻孔、気管および肺にチーズ状の壊死があり、syncytialの巨大細胞やバクテリアのgranulomas(PettanBrewerら、1996)に進行している、呼吸器官の中の上皮細胞に細胞核内含有物があった。
電子顕微鏡使用によって、ヘルペスウイルス状の粒子はその包含物内に見つかった。
2200匹の最近輸入されたチャコリクガメ(Geochelone chilensis)のうち、1200匹が3か月の間に死にましたが、そのチャコリクガメとともに輸入されて、ともに収容されたアカアシガメ(Geochelone
carbonaria)は、臨床的に健康な(Jacobsonら、1996)ままでした。検屍では、声門、口腔の上部および内部鼻孔のまわりの壊死した細胞質の砕片の蓄積を備えた口頭の粘膜の壊死が見られました。
光学顕微鏡使用によって、落屑（うろこのようなかさぶたとなって剥離する）され変質した上皮細胞は、エオジンで染まる細胞核内包含物を含んでいることが観察された。電子顕微鏡使用によって、包含物は、電子密度の濃厚なコアを持つウイルス粒子から成ることが実証された。ヘルペスウイルスと一致する粒子は、細胞膜に包まれているのが観察され、またおよそ125nmの長さの成熟した粒子は、細胞質で観察されました。
地中海リクガメのヘルペスウイルス伝染に関するいくつかの報告書があります。(Testudo graecaおよびT.hermanniに関してであるが。2つの個人的な集団から来た13匹のギリシアガメ(T。
graeca)のうち、2匹から、口内炎とともにヘルペスウイルス粒子が電子顕微鏡使用によって検知されました。クーパーら1988)
最初に、口頭の傷害から得られた脱脂綿（病人の口を洗ったり、薬剤をつけたりする）が様々な微生物の分離に役立った一方、多くの全体的または部分的な抗生物質による治療は疾病の進行経過に効果がありませんでした。結局、ヘルペスウイルスと一致するウイルス粒子は、気管支と口蓋の粘膜の皮膜組織内の電子顕微鏡観察によって確認されました。壊死性舌炎及び口内炎を持っている、16匹のヘルマンリクガメと8匹のギリシャリクガメでは、細胞核内の包含物が舌、気管、細気管支、肺胞、腎糸球体の毛細管の内皮細胞の上皮細胞で見つけられました。また、延髄中のニューロンおよび膠細胞内、および間脳(ミュラーら、1990)の中で見つけられました。
肝臓および気管の電子顕微鏡検査で肝細胞の核および気管の上皮細胞の中に六角形のヌクレオカプシドの存在が確認されました。細胞質中の包まれたビリオンは110-120nmの大きさで、ヘルペスウイルスと形態学的に一致していました。
著者は輸入されたリクガメが、このウィルスの潜在的キャリアーであると考えました。リクガメが受けていたストレスと寄生は、輸入されたリクガメ中のウィルスの臨床での発見（確認）を容易にしたかもしれません。電子顕微鏡使用によって、ヘルペス状の粒子は、ヘルマンリクガメの腸の内容物でも見られました。それらのヘルマンリクガメの何匹かは、上部の消化器官や肝腫および腸炎(Biermann
1995)内に、チーズ状の物質を持っていました。
原因論の代理人: ヘルペスウイルスの仲間は、直径にしておよそ100-150nmであるダブル繊維のDNAウィルスです。ウイルスのヌクレオカプシドは、外被によって囲まれた、162の
capsomers（ウイルス表面の構成蛋白質）を備えた立方体の対称構造を持っています。増殖（Replication）が、核膜からの包囲を備えた細胞の核の内に生じます。細胞核内の増殖の跡は、光学顕微鏡使用によって、ヘマトキシロンおよびエオシンで染色された細胞核内の包含物としてときどき見られます。感染しやすい種がさらされた場合の有効な伝染および疾病によって、多くのヘルペスウイルスが、本来のホストの中に、発病せずに存在するかもしれません。
口内炎/咽頭炎を持つ地中海リクガメからのヘルペスウイルスには、多様な分離があります。ヘルペスウイルスは、細胞培養から分離されました。それらの細胞は、2匹のヘルマンリクガメおよび1匹のロシアリクガメ(T.
horsfieldiii; Biermann and Blahak 1994)の脳や肺や気管および肝臓から採取したものである。また、7匹のヘルマンリクガメおよび1匹のロシアリクガメ(Kabisch
and Frost 1994)の脾臓、肝臓および脳から採取されたものもある。
血清中立化テスト（A serum neutralization test ）はヘルペスウイルスのリクガメへの感染を決定するために利用され、ある研究においては、ギリシアリクガメの42.5%およびヘルマンリクガメの18.5%で血清反応陽性だった(Frost
and Schmidt 1997)。
ホスト: ヘルペスウイルスと互換性をもつウィルスは以下のいくつかのリクガメの種類で（ゴファーガメ、チャコリクガメ、ヒョウモンガメ、ヨツユビリクガメ（ロシアガメ）、ヘルマンリクガメ、ギリシアリクガメおよびキアシガメ）見られてきました。その他の方法で証明されるまでは、すべてのリクガメは、感染しやすいと考えるべきです。
分類: ヘルペスウイルスは、飼育下のリクガメで世界的に発見されてきました。ヨーロッパでは、地中海リクガメの仲間がヘルペスウイルスによる感染に特に弱く見えます。健康状態が悪く、感染したリクガメは、さらに、ドイツ、フランス、スペイン、スイス、英国および日本で見られました。それは個人のペットの間で高度に広がっているように見えます。自然界の野生個体への伝染の広がりに関する、有効な情報はありません。
臨床のサイン: 一般的な臨床のサインは漿液状の鼻炎を含んでいます。それは鼻の粘液をたらします。これらのサインはカメのマイコプラズマ病で見られたものとオーバーラップします。典型的なケースでは、壊死を起こしている口内炎、舌炎および咽頭炎が見られます(図1;
図2; 図3)。呼吸困難が生じるかもしれません。結膜炎は呼吸困難のサインとともに観察されました。他のより一般的な臨床のサインとしては、拒食症と悪態症を含んでいます。中枢神経系の関与は不調整と機能傷害に結びつくかもしれません。
病理学: ジフテリア性の丸く盛り上がった斑点のみられる、壊死性のチーズ状の口内炎(口蓋および内部鼻孔を含んで)および舌炎は、ヘルペスウイルスに感染したリクガメに一般的にみられる症状です。(図4;
図5)上部の呼吸器官の関与は一般的に鼻炎と咽頭炎に関係しています。気管炎、肺炎、そして結局肺気腫として見られるように、下部の呼吸器官も冒されるかもしれません。光顕微鏡使用によって、細胞核内の包含物(図6;
図7; 図8)は、シンシチウムの巨大細胞およびバクテリア性の肉芽に加えて多数の組織の上皮細胞内に観察されるかもしれません。落屑された退化する上皮細胞はエオジン好性の細胞核内の包含物を含んでいるかもしれません。電子顕微鏡使用を使用すると、様々な発達段階のウイルスの粒子(図9;
図10)は、舌、気管、細気管支、肺胞、肝細胞、腸の上皮細胞、糸球体の、および延髄中のニューロンおよび膠細胞内の毛細管の内皮細胞および間脳の 上皮細胞の核および細胞質の内に見つけることができます。
伝染: 伝染の正確なルートは未知です。しかしながら、私たちが他の種の中の伝染に関して知っているものに基づいて考えると、個体間の感染は、リクガメからリクガメへの直接の接触によると思われます。誰も、ウィルスがどれくらいの時間感染性を持ったまま、環境に存在し続けるのか知りません。卵による縦方向の感染が、さらに生じるかもしれません。
分析: 口内炎/咽頭炎のような肉眼で見ることのできる傷害が観察される場合、ヘルペスウイルスの感染は特異の分析を行い、常に考慮されるべきです。細胞核内の包含物を分析に支えられながら探している間は、それらの構成を決定するために透過型電子顕微鏡使用を使用して、組織を検査することが必要です。ネガティブ
染色法による透過型電子顕微鏡観察は浸出物や削り取った組織および排泄物の標本中のビリオンを識別するために使用することができます。ウイルスの抽出は現在伝染を決定する最も決定的な方法です。ウイルスは市販のTerrepene培養心筋細胞に抽出することができます。動物のウイルス性病原体に対する抗体反応を測定する場合、血清無効化がしばしば常道と考えられている一方、9〜10日がもしかすると感染したかもしれないリクガメのtiter（幾つかの血清学的検査項目の量の単位）を決定するために要求されるという実際的な問題のために効用を制限しました。したがって、私たちは、私的にでも、動物学的にも、リハビリテーションや、飼育下のリクガメを自然界へもどすために設計された繁殖プログラムなどに対して広い適用を持つより迅速でより実際的な分析を開発するように設計された研究を始めました。
地中海リクガメの immunoglobulin（免疫系を構成する重要な要素である抗体（免疫グロブリン））は、Core Hybridoma Laboratory、ICBR、フロリダ大学で浄化されました。また、マウスモノクローナル抗体やポリク
ローナル抗体はこの免疫グロブリンに対して生産されました。この試薬で、私たちは、このウィルス(es)の正体暴露を決定するための免疫過酸化酵素法およびELISAベースのアプローチを開発するでしょう。
コントロールと治療: 病気の、もしくは感染の疑いのあるカメは、臨床的に健康なカメから分離されるべきです。新しいカメはすべて、主要な飼育しているカメ達といっしょにする前に最低でも90日間（検疫）隔離されるべきです。アシクロビルのような抗ウイルス薬による治療が推奨されてきました。抗生物質は二次感染のコントロールにおいて有用かもしれません。囲いの消毒は、ペットのカメの飼育環境における囲いのタイプに依存します。ウィルスが数週間の間、土や飼育環境中に生存し続けるかもしれないので、屋外の囲いは恐らく循環（別の囲いにしばらくは移すの意味）させるべきです。カメが、金属性の家畜飼育用水槽あるいはゴム性のコンテナーの中で飼育されている場合、コンテナーは3%の次亜塩素酸ナトリウムで消毒することができます。
現在と将来の研究:
1)リクガメのヘルペスウイルス感染をはっきりさせるための ELISAおよび免疫過酸化酵素法に基づく血清学的テストの開発。亀甲状免疫グロブリンはモノクローナル抗体
やポリクロ ーナル抗体 などの抗体生産のために分離され浄化されました。
2) 組織や浸出物中のヘルペスウイルスのDNAの特定の塩基配列の存在の断定をいち早く、判断するための合成酵素連鎖反応(PCR)方法の開発。
3) 血清学のテストでの抗原として役立つウイルスの糖タンパク質のクローニング。